Logo lt.boatexistence.com

Ar galima užšaldyti ripa buferį?

Turinys:

Ar galima užšaldyti ripa buferį?
Ar galima užšaldyti ripa buferį?

Video: Ar galima užšaldyti ripa buferį?

Video: Ar galima užšaldyti ripa buferį?
Video: RIPA Buffer Protocol & Recipe 2024, Gegužė
Anonim

Galima užšaldyti ir atšildyti RIPA buferį 2–3 kartus neprarandant savo stiprumo, kol naudojimo metu (20-30 min.) jis laikomas ant ledo. Buferį laikykite užšaldytą -80 laipsnių C temperatūroje.

Kiek laiko galiu laikyti RIPA buferį?

1. Jei buferis bus naudojamas nuolat, rekomenduojama, kad 10 kartų buferis būtų laikomas 4 °C temperatūroje 1-2 savaites. Ilgesnį laiką buferis turi būti laikomas -20°C temperatūroje. Jei reikia atlikti daug mažų eksperimentų, rekomenduojama padalyti 10 kartų buferį.

Ar RIPA buferis gali būti saugomas?

Paruoštas RIPA buferis turi būti padalytas į alikvotas ir laikomas −20°C temperatūroje. Prieš naudojant nedelsiant į atšildytą alikvotinę dalį įpilkite proteazės ir (arba) fosfatazės inhibitorių. Vieno mililitro buferio pakanka maždaug 5 milijonams ląstelių lizuoti. …

Kaip laikote RIPA lizatus?

Paruoštus lizatus naudokite kuo greičiau ir laikykite kuo trumpiau. Laikykite lizatus –80 ℃ kiek įmanoma ilgiau. Jei lizatai turės būti laikomi ilgą laiką, perkelkite šviežiai paruoštus mėgintuvėlius į turimą -80 ℃ šaldiklį, kad išvengtumėte degradacijos.

Kaip atšildyti RIPA buferį?

Paėmę galutinį plovimo tirpalą iš ląstelių, į ląstelių nuosėdas įpilkite atitinkamą tūrį RIPA buferio (1 ml 0,5–5 × 107 ląstelėms) ir trumpai sumaišykite arba sumaišykite, kad ląstelės būtų visiškai suspenduotos. Inkubuokite ant ledo arba šaldytuve (2–8 °C) penkias minutes.

Rekomenduojamas: