Restrikcijos virškinimas atliekamas tikslinės DNR molekulės inkubacijos būdu su restrikcijos fermentais – fermentais, kurie atpažįsta ir suriša specifines DNR sekas ir atskiria tam tikrus nukleotidus atpažinimo sekoje arba už jos ribų. atpažinimo sekos.
Kaip virškina restrikcijos fermentai?
Restriction Enzyme Digest Protocol
- Pridėkite komponentų į švarų vamzdelį nurodyta tvarka: …
- Reakciją inkubuokite virškinimo temperatūroje (paprastai 37 °C) 1 valandą.
- Sustabdykite virškinimą inaktyvuodami šilumą (65 °C 15 minučių) arba pridėdami 10 mM galutinės koncentracijos EDTA.
Ar restrikcijos fermentas virškina DNR?
Restrikcijos fermentai taip pat gali būti naudojami suderinamiems PGR produktų galams sukurti. … Visais atvejais vienas ar daugiau restrikcijos fermentų yra naudojami DNR virškinimui, gaudaminekryptiškai arba kryptingai įterpiant į suderinamą plazmidę.
Kaip veikia DNR restrikcijos fermentai?
Kaip veikia restrikcijos fermentai? Kaip ir visi fermentai, restrikcijos fermentas veikia suderindamas formą su forma Kai jis liečiasi su DNR seka, kurios forma atitinka fermento dalį, vadinamą atpažinimo vieta, jis apgaubia DNR ir nutrūksta abiejose DNR molekulės grandinėse.
Koks fermentas virškina DNR?
Šie fermentai vadinami restrikcijos endonukleazėmis arba restrikcijos fermentais, ir jie gali skaidyti DNR molekules tose vietose, kuriose yra tam tikros trumpos bazių sekos.
