Logo lt.boatexistence.com

Kaip atlikti imunofluorescenciją?

Turinys:

Kaip atlikti imunofluorescenciją?
Kaip atlikti imunofluorescenciją?

Video: Kaip atlikti imunofluorescenciją?

Video: Kaip atlikti imunofluorescenciją?
Video: Immunofluorescence 2024, Gegužė
Anonim

Toliau pateikiama skirtingų netiesioginio dažymo imunofluorescenciniu būdu protokolo etapų apžvalga

  1. Eksperimento planavimas ir mėginių paruošimas. …
  2. Pavyzdinis fiksavimas. …
  3. Ląstelių pralaidumas. …
  4. Blokavimas. …
  5. Pirminis antikūnų inkubavimas. …
  6. Antrinis antikūnų inkubavimas. …
  7. Daugymas ir montavimas.

Kaip atliekate imunofluorescenciją?

Visi inkubavimo etapai vyksta kambario temperatūroje

  1. Nuplaukite ląsteles du kartus ir pincetu atsargiai įdėkite dengiamąjį stiklelį su apverstomis ląstelėmis į drėgną kamerą.
  2. Fiksuokite 4 % formaldehidu 10 minučių ir nuplaukite 3 ×.
  3. Pralaidžiai su 0,1 % TX-100/PBS 15–20 minučių ir nuplaukite 3 ×.

Kaip naudoti imunofluorescenciją ląstelėje?

Prilipusių ląstelių imunofluorescencijos protokolas

  1. Sėjama 1–1,5 x104 ląstelių viename 4 kamerų stiklelio šulinyje 500 ml auginimo terpės. Inkubuoti 37°C temperatūroje, esant 5 % CO2.
  2. 32–36 valandos po ląstelių pasėjimo pašalinkite ląstelių auginimo terpę ir 3 kartus praplaukite ląsteles naudodami 500 µL 1X PBS.

Kas yra imunofluorescencijos pavyzdys?

Pavyzdžiui, tyrėjas gali sukurti pirminius antikūnus ožkoje, kurie atpažįsta kelis antigenus, o tada panaudoti su dažais susietus triušio antrinius antikūnus, atpažįstančius ožkos antikūnų pastovią sritį (" triušio anti-ožkos" antikūnai).

Kam naudingas dažymas imunofluorescenciniu būdu?

Imunofluorescencinis (IF) dažymas yra plačiai naudojama biologinių tyrimų ir klinikinės diagnostikos metodika IF naudoja fluorescenciniu būdu pažymėtus antikūnus, kad aptiktų specifinius tikslinius antigenus. Po to seka vaizdavimas, tai labai tiesioginė technika, nes iš tikrųjų galite kažką pamatyti.

Rekomenduojamas: